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什么是胎牛血清,血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),該如何處理

更新時間:2020-10-16  |  點擊率:2542

血清就是去除了血細胞和纖維蛋白(用于凝血)的成分之后,剩下的血液中的液體。在細胞體外培養(yǎng)中常需要添加血清。血清是細胞所需的營養(yǎng)物質(zhì)的天然來源,具有許多人工合成的培養(yǎng)基所不具備的營養(yǎng)因子。它的應用已經(jīng)有了100多年的歷史。那么血清里面含有什么成分呢?

例如《生物制品學雜志》 1981年第1期第22頁上就發(fā)表過1篇《血清的性質(zhì):血清成分的分析》文章,作者是Macleod AJ等。這是一篇翻譯。原始出處是AJ Macleod,O Drummond. Serum quality: an analysis of its components. Developments in Biological Standardization.1980,46:17。
該文章開始提到的是蘇格蘭國立輸血站蛋白分離中心用序貫低溫酒精沉淀法處理人血漿,得到了很多成分(注: 血漿是去除了血細胞的血液液體,和血清區(qū)別是含有纖維蛋白原),包括凝血因子、纖維蛋白原、免疫球蛋白、白蛋白、a球蛋白和b球蛋白,很多有重要的治療作用。該中心曾在1年中處理了5萬升血漿,得到了750kg的血漿蛋白。血漿蛋白中的許多蛋白質(zhì)對細胞生長很重要,如銅藍蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白和生長調(diào)節(jié)素(somatomedin),還有一些蛋白酶抑制劑,如a-抗胰蛋白酶、抗凝血酶III和a2-巨球蛋白。
該文還指出,胎牛血清蛋白含量一般低于新生?;虺膳Q?。用醋酸纖維素電泳作蛋白成分分析,胎牛血清的白蛋白含量比其他血清高,而球蛋白的含量比其他血清低得多。
注:生長調(diào)節(jié)素(somatomedin)是過去使用的名字,是一類促進細胞生長分裂的物質(zhì)。現(xiàn)已發(fā)現(xiàn),胰島素樣生長因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)是生長調(diào)節(jié)素A,玻連蛋白是生長調(diào)節(jié)素B,胰島素樣生長因子1(IGF-I)稱為生長調(diào)節(jié)素C。
a1-抗胰蛋白酶:主要由肝臟合成,主要作用是保護機體正常細胞和器官不受蛋白酶的損傷,抑制感染和炎癥,維持機體內(nèi)環(huán)境的平衡。
a2-巨球蛋白:是血漿中分子量大的蛋白質(zhì)。分子量約為65.2萬-80萬,含糖量約8%,由4個亞單位組成。它與淋巴網(wǎng)狀系統(tǒng)細胞的發(fā)育和功能有密切聯(lián)系。
球蛋白主要與機體免疫功能有關(guān)。
懷孕5-8個月的母牛被屠宰,發(fā)育未*的牛胚胎心臟穿刺采血獲得。此時胎牛血中含有特殊的生長發(fā)育因子,一旦胚胎發(fā)育*這些因子自動消失。
血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因,但pu遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后,也會存在于血清中,亦是造成沉淀物的原因之一。但這些絮狀沉淀物,并不影響血清本身的質(zhì)量。
若欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi),以400轉(zhuǎn)/分離心1-2分鐘,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。hao不使用過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因為它可能會阻塞過濾膜。在解凍血清時,建議隨時將血清搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。
 

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