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支原體DNA提取試劑盒

更新時(shí)間:2020-10-14  |  點(diǎn)擊率:913

支原體檢測(cè)的核酸法,已廣泛應(yīng)用于細(xì)胞支原體篩查和生物制品企業(yè)的生產(chǎn)放行檢測(cè)中。

但在使用PCR方法檢測(cè)支原體之前,由于有些待檢樣品的成分過(guò)于復(fù)雜,或含有的某些成分會(huì)抑制PCR反應(yīng)的進(jìn)行,因此需要使用『支原體DNA提取試劑盒』提前做DNA的提取工作。

對(duì)于生物藥或需遵循藥典的樣本,也由于樣品基質(zhì)可能會(huì)影響檢測(cè)的靈敏度,因此需要樣本做DNA抽提處理,實(shí)現(xiàn)核酸法gao的靈敏度。

這里向您推薦德國(guó)MB公司生產(chǎn)的支原體DNA提取試劑盒

英文品名:

Venor®GeM Sample Preparation Kit

該試劑盒已經(jīng)過(guò)多方廣泛驗(yàn)證,有很多引用文獻(xiàn);

它已達(dá)到歐洲藥典標(biāo)準(zhǔn),可用于PCR或qPCR檢測(cè)支原體的方法學(xué)驗(yàn)證。

1

產(chǎn)品信息:

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產(chǎn)品特點(diǎn)

1)符合歐洲藥典的要求。

2)采用離心管柱的方法,全程只需30分鐘。

2)從細(xì)胞上清和生物制品中,均可分離支原體DNA。

3)洗脫DNA純度高,體積50μl,保證PCR大的靈敏度。

3

操作步驟

四步法:

1)細(xì)胞裂解

2)DNA吸附到核酸純化柱上

3)去除殘留污染物和抑制劑

4)DNA洗脫

試劑盒組分:

Spin columns(核酸純化?。?/p>

Collection tubes(收集管)

Conditioner液

Binding Buffer液

Buffer A1液

Buffer A2液

Buffer E液

操作示意圖:

4

所需其他材料及儀器:

  • >96%無(wú)水乙醇
  • EP管(1.5ml或2ml)
  • 離心機(jī)和恒溫儀(用于1.5ml 或2ml 離心管)
  • 移液器及帶濾芯吸頭(100μl 和1000μl)
  • 可選:蛋白酶K(貨號(hào)56-0002),用于處理富含蛋白(>10mg/ml)的樣品。
  • 可選:DNA 內(nèi)控對(duì)照,用于配合

Venor®GeM Classic Kit(貨號(hào)11-1025)

以保證操作過(guò)程沒(méi)有問(wèn)題。

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注意事項(xiàng):

1. 支原體DNA 提取試劑盒一次可從多含有1X 106 細(xì)胞/ml 的細(xì)胞上清中直接分離DNA。

2. 富含蛋白的樣本(蛋白含量>10mg/ml)可能需要蛋白酶K 處理后,再抽提DNA。

3. 此試劑盒不適于提取真核細(xì)胞組織的DNA。

4. 若在提取DNA時(shí)加入了內(nèi)控DNA對(duì)照,則在支原體核酸法檢測(cè)時(shí)不需要再加內(nèi)控對(duì)照。我們推薦使用對(duì)照,以驗(yàn)證結(jié)果的可靠性,也有助于排除故障。

5. 不要使用其他酒精來(lái)替代乙醇,它將導(dǎo)致核酸產(chǎn)量的下降。

6. 緩沖液E(Buffer E)的預(yù)熱,會(huì)顯著改善核酸的產(chǎn)量。

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